Décrypter le mode d’action structural d’une nouvelle cible anticancéreuse, la protéine Crip1a
Type d'annonce : Offre de stage
De : Centre de Biochimie Structurale , Montpellier
Contexte
Le récepteur aux canabinoïdes de type 1 (CB1R) est reconnu comme une cible thérapeutique intéressante pour de nombreux cancers, pour ses capacités à moduler l’apoptose, la prolifération, la migration, l’adhésion, et l’invasion. Des niveaux d’expression hors norme de CB1R sont retrouvés dans de multiples pathologies néoplastiques, telles que les gliomes (Choucair et al, 2022), le cancer de la prostate (Sarfaraz et al, 2008), du colon (Proto et al, 2012), du sein (Caffarel et al, 2010), du foie (Mukhopadhyay et al, 2015) ou de l’ovaire (Messalli et al, 2014). CB1R fait partie de la famille des récepteurs couplés aux protéines G (ou RCPG), protéines comportant sept hélices membranaires qui activent les protéines G, les protéines inhibitrices Gi dans le cas de CB1R, conduisant à l’inbition de l’adenyl cyclase. La protéine Crip1a a été identifiée comme une protéine clé de la modulation de CB1R (Niehaus et al, 2007), en supprimant son activité constitutive et modulant son spectre d’interaction avec les différents sous types de protéine Gi GiO, Gi1, Gi2, Gi3, Gi4 et Gz. Bien qu’il ait été établi que Crip1a n’interagisse pas directement avec les protéines arrestines, Crip1a entre en compétition avec elles pour la la liaison du CB1R, empêchant l’endocytose de ce dernier et permettant une signalisation prolongée via les protéines Gi. Crip1 est reconnue comme une proteine suppresseuse de tumeurs malignes. Elle est sous exprimée dans de nombreuses pathologies cancéreuse, et sa sous-expression est un marqueur sanguin précoce de tumeurs sanguine dans le cas du cancer de colon (Zhan et al, 2022), mais également de récidive après ablation dans le cancer de la prostate (Corradi et al, 2021). Inversement, sa transfection dans des cellules cancéreuses de colon décroît l’invasion et la migration des cellules malignes (Sun et al 2022).
Objectif
Crip1 représente une cible anticancéreuse originale, au mode d’action inconnu. Les bases de la modulation de l’activité de CB1R par Crip1 restent en effet incomprises au niveau moléculaire et atomique. Notre projet développe une approche structurale innovante pour décrypter le mode d’action de Crip1 vis-à-vis de CBR1. Dans ce but, nous combinerons la puissance de l’approche par Résonance Magnétique nucléaire pour obtenir une image locale du complexe CB1R-Cter/Crip1, à la puissance des contraintes de distance obtenue par transfert de fluorescence en molécule unique avec des acides aminés non naturels pour replacer le complexe dans l’architecture du récepteur entier. L’identification des surfaces d’interaction au niveau atomique permettra la conception de mimes peptidiques permettant de reproduire l’action inhibitrice de Crip1. Ces peptides seront testés dans les tests développés in vitro pour le projet.
Environnement
Ce stage de 6 mois est financé par la Ligue contre le Cancer, sous la responsabilité d’Hélène Déméné (DR CNRS) et Robert Quast (CR INSERM) dans l’équipe Biophysique Intégrative des Membranes (Dir. E. Margeat-P.E. Milhiet) au Centre de Biologie Structurale à Montpellier.
Il bénéficiera de l’expertise de l’équipe en biologie structurale (Sounier. et al Nature 2015 ; Bous et al. Sci Adv 2021 ; Cap et al. Nat Comm 2021 ; Cong et al. Mol Cell 2021, Lecat-Guillet et al. Sci Adv 2023 ; Yang et al. Structure 2020; Poignavent et al. J Mol Biol 2022; Agam et al. Nat Methods 2021 ; Lecat-Guillet et al. Sci Adv 2023).
Le Centre de Biochimie Structurale offre un environnement de travail international stimulant. Il héberge des spectromètres à très haut champ 800 et 700 MHz équipés de sondes cryogéniques et des spectromètres de fluorescence confocaux permettant de faire du FRET en molécule unique. Il représente une infrastructure unique allant de la RMN à la cristallographie en passant par la microscopie électronique et les spectroscopies fluorescence les plus avancées en France.
Compétences
Nous recherchons un étudiant inscrit en Master et intéressé par la biochimie préparative, biologie moléculaire (incorporation d’acides aminés non naturels) et la biophysique structurale pour un stage de 6 mois idéalement pour la période fevrier-juilet 2025, mais pouvant commencer en décembre 2024.
Contacter Hélène Déméné, helene.demene@cbs.cnrs.fr (CV et lettre de motivation).
Détails de l'annonce
- Profil : étudiant inscrit en Master et intéressé par la biochimie préparative, biologie moléculaire (incorporation d’acides aminés non naturels) et la biophysique structurale
- Durée de contrat : 6 mois
- Date de prise de fonction : février 2025
- Documents à fournir pour candidater : CV, Lettre de motivation
- Date limite de candidature : 01/01/2025
Personne à contacter
- Nom : DEMENE Hélène
- Email : helene.demene@cbs.cnrs.fr